Rozwiązywanie problemów i optymalizacja PCR: Niezbędny przewodnik

Oryginalny tytuł:

PCR Troubleshooting and Optimization: The Essential Guide

Zawartość książki:

Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) jest podstawowym narzędziem w badaniach naukowych i testach klinicznych. PCR w czasie rzeczywistym, łącząca amplifikację i detekcję w jednym urządzeniu, jest szybką i dokładną metodą wykrywania i kwantyfikacji kwasów nukleinowych.

Chociaż PCR jest bardzo skuteczną techniką, uzyskane wyniki są ważne tylko wtedy, gdy zastosowano odpowiednie kontrole. Ponadto, właściwa optymalizacja warunków PCR jest wymagana do generowania specyficznych, powtarzalnych, odtwarzalnych i czułych danych. Niniejsza książka omawia strategie przygotowywania skutecznych kontroli i standardów dla PCR, kiedy należy je stosować i jak interpretować dostarczane przez nie informacje.

Podkreśla znaczenie optymalizacji dla wydajności, precyzji i czułości metodologii PCR oraz zapewnia niezbędne wskazówki dotyczące rozwiązywania problemów z nieefektywnymi reakcjami. Eksperci w dziedzinie PCR opisują techniki projektowania i optymalizacji, omawiają zastosowanie odpowiednich kontroli, wyjaśniają znaczenie krzywych standardowych oraz badają zasady i strategie wymagane do skutecznego rozwiązywania problemów.

Książka podkreśla znaczenie przygotowania i jakości próbek, projektowania starterów, kontrolowania inhibitorów, unikania zanieczyszczenia amplikonów i środowiska, optymalizacji jakości i stężenia odczynników oraz modyfikacji protokołu cykli termicznych w celu uzyskania optymalnej czułości i swoistości. Ponadto w poszczególnych rozdziałach omówiono historię PCR, wybór oprzyrządowania, zastosowania PCR w metagenomice, analizę topnienia w wysokiej rozdzielczości, wytyczne MIQE oraz PCR w skali mikrolitrowej.

Strategie, wskazówki i porady zawarte w tym zwięzłym tomie umożliwią naukowcom optymalizację i skuteczne rozwiązywanie problemów w szerokim zakresie technik, w tym PCR, PCR z odwrotną transkryptazą, PCR w czasie rzeczywistym i ilościowej PCR. Będzie to niezbędna książka dla każdego, kto korzysta z technologii PCR.